Az élő sejtek képalkotás mikroszkópokat igényelamelyek minimalizálják a fototoxicitást, fenntartják a sejtek életképességét, és idővel nagy felbontású képalkotást biztosítanak. Általános döntések a következők:
1. fordított fluoreszcencia mikroszkópok:
Widefield mikroszkópok: környezeti kontrollokkal (hőmérséklet, CO₂, páratartalom) és érzékeny kamerákkal (például SCMO -k) felszerelt. Gyakran párosítva fáziskontrasztdal vagy DIC-vel (differenciális interferencia kontraszt) a címke-mentes képalkotáshoz.
Forgatási lemez konfokális: Csökkenti a fényfehérítés gyorsabb szkenneléssel, mint a hagyományos lézeres szkennelés konfokális. Ideális dinamikus folyamatokhoz.
2.
Csak a fókuszt síkot világítja meg, drasztikusan csökkenti a fény expozíciót és lehetővé teszi a hosszú távú képalkotást (például óráktól napokig).
3. kétfotonos mikroszkópia:
Közel infravörös fényt használ a mélyebb szövet behatolásához és a csökkentett fototoxicitást, amely alkalmas vastag mintákhoz, például 3D-s tenyészetekhez.
4. TIRF (teljes belső reflexiós fluoreszcencia):
Megjeleníti az eseményeket asejtmembrán(például a vezikulum -kereskedelem) vékony (~ 100 nm) optikai szakasz leképezésével.
5. szuper felbontású mikroszkópok (például Sted, SIM):
Nagyobb felbontást érjen el, de gondos optimalizálást igényel a fény expozíciója és a sejtek egészségének kiegyensúlyozása érdekében.
6. Élő-sejt-optimalizált rendszerek:
Helyezze be a környezeti kamrákat, az adaptív optikát és a gyenge fényviszonyok detektorokat (például EM-CCD kamerák).
Az élő képalkotás legfontosabb jellemzői:
- Környezetvédelmi ellenőrzés: Fenntartja a hőmérsékletet, a CO₂ -t és a páratartalmat.
- Gyors beszerzés: Minőségi elmosódás minimalizálja a dinamikus folyamatokhoz.
- Alacsony fototoxicitás: Szűrők, LED -es fényforrások vagy fénylemez megvilágítás csökkenti a károsodást.
Válasszon a felbontási igények, a képalkotó időtartam és a mintaérzékenység alapján.
